Cada grupo deve defender o projeto abaixo: 1. Objetivo: caracterizar a mudança da expressão gênica no cérebro sob efeito de estresse. Objetivos específicos: a) submeter camundongos a tratamento de estresse por cinco dias, aprisionando-os por duas horas todos os dias dentro de tubos falcon de 50 mL. b) isolar o hipotálamo desses animais e de animais controle e isolar mRNA c) gerar bibliotecas de cDNA e isolar 20 mil ESTs de cada biblioteca (apenas a EST 5') d) verificar as ESTs que formam clusters e usar o software PHRAP para gerar contigs das mesmas e) anotar esses contigs e singlets (ESTs únicas) com o software BLAST pesquisando homologia em bancos de dados f) selecionar as ESTs com freqüência diferente nas duas bibliotecas g) validar a expressão desses genes 2. Objetivo: o mesmo do grupo 1 Objetivos específicos: a) idem grupo 1 b) idem grupo 1 c) obter um chip de oligonucleotídeos contendo 10 mil genes de camundongo d) realizar experimento de microarranjo comparando as duas preparações de mRNA (controle e estresse) e) validar a expressão dos genes diferencialmente expressos 3. Objetivo: o mesmo do grupo 1 Objetivos específicos: a) idem grupo 1 b) idem grupo 2 c) desenhar iniciadores específicos para genes induzidos por exposição de ratos a odor de gato (dados já publicados) d) comparar a expressão desses genes nas duas amostras (controle e estresse) 4. Objetivo: mesmo que o grupo 1 Objetivos específicos: a) idem grupo 1 b) isolar o hipotálamo desses animais e purificar proteínas nucleares c) comparar o perfil de géis bidimencionais das duas amostras (controle e estresse) d) sequenciar por espectrometria de massa os "spots" diferentes e) comparar com o PM exato de produtos protéicos do genoma do camundongo para identificar as proteínas diferencialmente expressas f) validar através de outra técnica 5. Objetivo: descobrir genes envolvidos na resistência de soja ao fungo que produz a ferrugem Objetivos específicos: a) isolar fungo de cultivares infectados b) submeter cultivares de soja a infecção com fungo em casa de vegetação c) extrair o RNA de folhas após 48 horas de infecção e de folhas controle e purificar mRNA d) idem grupo 1 e) idem grupo 1 f) idem grupo 1 g) idem grupo 1 6. Objetivo: o mesmo do grupo 5 Objetivos específicos: a) idem grupo 5 b) idem grupo 5 c) idem grupo 5 d) idem grupo 1 utilizando as 371817 ESTs presentes no banco de dados dbEST e) imprimir uma lâmina de microarranjo com os clones que produzem as ESTs singlets e com um representante de cada contig. f) idem grupo 2 objetivo "d" g) idem grupo 2 objetifo "e" 7. Objetivo: o mesmo do grupo 5 Objetivos específicos: a) idem grupo 5 b) idem grupo 5 c) idem grupo 5 d) produzir blbiliotecas SAGE a partir das duas amostras (controle e estresse) e) identificar as Tags diferencialmente expressas f) mapear as Tags em genes de soja descritos (1162 genes) g) validar através de outra técnica 8. Objetivo: o mesmo do grupo 5 Objetivos específicos: a) idem grupo 5 b) idem grupo 5 c) comparar o perfil de géis bidimencionais das duas amostras (infectado e controle) d) sequenciar O N terminal dos "spots" diferentes pela técnica de Edman e) identificar por similaridade com bancos de dados o possível gene, incluindo na pesquisa seqüências do projeto genoma em progresso (total de 741.194 seqüências), utilizando para este fim o programa tBLASTn f) validar a expressão diferencial utilizando mRNA cedido pelo grupo 5